Антигены опухолевых клеток. Определение антигенов опухолевых клеток.
Обновлено: 25.06.2024
Исследование аберрантной экспрессии рековерина и других раково-сетчаточных антигенов в злокачественных опухолях НИР
- Руководитель НИР: Филиппов П.П.
- Участники НИР: Бажин А.В., Ворожейкина И.П., Ганчарова О.С., Головастова М.О., Килина О.В., Савченко М.С., Скорикова Е.Е., Хишов А.С.
- Подразделение: Отдел сигнальных систем клетки
- Срок исполнения: 1 января 2009 г. - 31 декабря 2011 г.
- Номер договора (контракта, соглашения): 09-04-00395-а
- Тип: Фундаментальная
- Приоритетное направление научных исследований: Структура и функционирование клетки. Межклеточные взаимодействия. Молекулярные механизмы клеточной дифференцировки, иммунитета и онкогенеза. Взаимодействие вирус-клетка.
- ПН России: Науки о жизни
- Направление технологического прорыва России: Медицинские технологии и лекарственные средства
- Рубрики ГРНТИ:
- 31.27.31 Биохимия опухолей
- 76.03.35 Медицинская гистология
Задача 1. Завершен поиск внутриклеточной мишени для рековерина в опухолевых клетках. Специфического связывания белков-мишеней для рековерина не было выявлено ни методом аффинного связывания потенциальных мишеней с иммобилизованным рековерином (см. отчет за 2009 год), ни методом иммунопреципитации с поликлональными моноспецифическими антителами против рековерина. Сделан вывод, что в изученных типах опухолевых клеток отсутствуют белки, функционально связанные с рековерином, и, следовательно, рековерин в этих клетках, в отличие от фоторецепторных клеток, не вовлечен в какие-либо сигнальные пути. Поскольку нами в исследование были взяты опухолевые клетки разных типов, сделанный вывод, скорее всего, справедлив и для любых других опухолевых клеток. Задача 2. Ранее мы обнаружили аберрантную экспрессию раково-сетчаточных антигенов в опухолях легких (рековерин) и в кожной меланоме (рековерин и другие раково-сетчаточные антигены). На данном этапе выявлена аберрантная экспрессия рековерина и некоторых других раково-сетчаточных антигенов в аденокарциномах поджелудочной железы, эндометрия, молочной железы и прямой кишки и в кожной Т-клеточной лимфоме. Задача 3. Ранее частота сывороточных аутоантител против рековерина была определена нами для пациентов с опухолями легких и кожной меланомой. На данном этапе проекта завершен анализ образцов сыворотки крови, взятых от пациентов с целым рядом других онкологических заболеваний. Аутоантитела против некоторых других раково-сетчаточных антигенов таких, как родопсин, трансдуцин и аррестин, найдены у некоторых пациентов с аденокарциномой поджелудочной железы.
Источник финансирования НИР
Этапы НИР
Прикрепленные к НИР результаты
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, . ). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".
Материалы конгрессов и конференций
В последнее время наблюдается прорыв в понимании молекулярно-генетических механизмов, ответственных за активацию иммунитета, которые меняют взгляд на иммунотерапию рака от сценария «призрачных сновидений» до подобающей клинической реальности. Сейчас убедительно показано, что Т-клетки и NK-клетки, а также подходы, основанные на антителах, могут обеспечить сильные противоопухолевые эффекты, и появляются доказательства излечения пациентов с ранее неизлечимым раком. Это становится возможным благодаря оптимизации иммунотерапевтических подходов, коррекции иммуноактивирующих сигналов, удалению ингибирующих факторов и устранению развития нового иммунорезистентного фенотипа опухоли.
Перед исследователями, работающими над проблемой создания современных противоопухолевых вакцин, стоит особая задача – не просто приготовить вакцину, а создать вакцину, которая бы обеспечила развитие специфического иммунитета даже в случае, если против данного нативного антигена (вакцины) иммунного ответа не возникает.
Традиционно опухолеассоциированные антигены (ОАА) относят к числу не иммуногенных или слабо иммуногенных антигенов и связывают это с тем, что организм не способен обеспечить эффективную иммунную реакцию против растущей опухоли. Однако инфильтрация опухоли и ее метастазов CD8 + и CD4 + Т-клетками, NK и NKТ-клетками, дендритными клетками (ДК) в большинстве случаев свидетельствует об иммуногенности опухоли. Высокое содержание опухоль-инфильтрирующих ДК может указывать на дальнейшую стимуляцию иммунного ответа, и ассоциировано с лучшим прогнозом у онкологических больных. Вместе с тем форма, в которой опухолевый антиген распознается иммунной системой, дискутируется до настоящего времени.
Это связано с тем, что вопрос о функции Т-клеточных антиген распознающих рецепторов (ТКР) и их генов неотделим от функциональной роли антигенов МНС (major histocompatibility complex). ТКР распознает и связывает антиген только в контексте собственных МНС-антигенов. ТКР воспринимает антиген как чужой у цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) в контексте антигенов МНС класса I, а у Т-хелперов – класса II. Наличие α/β-гетеродимера ТКР, экспрессия его генов и образование соответствующих мРНК имеют место также у NК и NKT-клеток.
Поскольку в геноме организма закодированы несколько разновидностей антигенов МНС каждого класса, и все они представлены на поверхности, это дает клетке возможность презентировать большое количество разных антигенов. Все же в сумме эти молекулы способны распознавать не все белки и полипептиды. Истинная величина их неизвестна. Если антигены МНС индивида не связывают данный полипептид, тимусзависимая реакция на него невозможна, даже если имеются подходящие ТКР. Это может иметь серьезные последствия для организма: например, неспособность представлять какой-либо бактериальный или вирусный антиген влечет за собой слабый иммунный ответ на него, а значит, неустойчивость к данной инфекции. Таким же образом способность организма отвечать на ОАА зависит, в конечном счете, от собственного набора генов МНС I класса.
Принципиально новые аспекты в индукции противоопухолевого иммунного ответа возникают в связи с изучением роли высоко профессиональных ДК в презентации ОАА. Сейчас установлено, что многие опухоли избегают прямого действия ЦТЛ не только в результате дефектов в специфичности их ТКР, но в большей степени вследствие неэффективной кросс-презентации опухолевых антигенов «специализированными» антигенпрезентирующими клетками.
Вместе с тем любой путь в индукции эффективного противоопухолевого иммунного ответа является неполным. G.J.D. van Mierlo с соавт. (2005) показали, что антиген из региона 1А аденовируса человека 5-го типа, экспрессированный на опухолевых клетках, вызывает противоопухолевый ответ ЦТЛ только в случае если он презентируется неактивированным CD11с + ДК. Даже представление этих клеток «наивным» ЦТЛ в дренированных лимфатических узлах не способствовало продуктивному иммунному ответу.
Прогресс в использовании цельных опухолевых клеток связан с развитием молекулярно-генетических технологий и трансфекцией в опухолевые клетки генов, кодирующих цитокины или другие активные молекулы. В результате в опухолевом микроокружении или локально в месте введения вакцины наблюдается изменение иммунологического микроокружения, усиление презентации ОАА, кросс-презентация опухолевых антигенов ДК, активация опухоль-специфических лимфоцитов и их специфическая терминальная дифференцировка.
Вместе с тем активация ЦТЛ-опосредованного противоопухолевого иммунного ответа к ОАА, экспрессированных на аутологичных опухолевых клетках, может быть блокирована опухолью с помощью механизмов связанных с толерантностью к собственным антигенам, не зависимо от стадии заболевания. R. Mortarini с соавт. (2003) показали, что развитие метастазов в лимфатических узлах является пусковым моментом в развитии CD8 + Т-клеточно-опосредованного иммунитета к собственным меланоцитарным дифференцировочным антигенам. Увеличение предшественников CD8 + Т-клеток к эпитопам Melan-A/Mart-1, gp100 и тирозиназе, накопление функционально активных Т-клеток памяти, взаимодействующих с Melan-A/Mart-1 антигенами в вовлеченных в опухолевый процесс лимфатических узлах, в большей степени выявлялось у пациентов с III и IV стадией заболевания по сравнению с пациентами I и II стадии. Вместе с тем CD8 + Т-клетки из опухоль-вовлеченных лимфатических узлов у большинства пациентов демонстрировали иммунофенотип «предшественников» (CCR7 + CD45RA + CD27 + CD28 + перфорин - ). Только в 7 из 23 случаев анализа антиген-специфических CD8 + Т-клеток выявлен «претерминальный» дифференцировочный фенотип (CCR7 - CD45RA - CD27 + CD28 - перфорин + ). В условиях ex vivo эти клетки дифференцировались в зрелые секретирующие перфорин и гранзим Б ЦТЛ. Небольшое содержание в опухоли терминально-дифференцированных CD8 + клеток свидетельствует о необходимости разработки иммунотерапевтических подходов, направленных не только на стимуляцию, но и на дифференцировку ЦТЛ.
При разработке вакцин часто используют антигенные пептиды уже известных ОАА. Эти молекулы синтезируют с помощью современных технологий, они доступны и относительно не дорогие. Важным в разработке пептидных вакцин является идентификация эпитопов ОАА человека, выполняющих ключевую роль в процессинге антигена и распознавания его Т-клетками. Этот подход позволил отобрать большое количество ОАА, в том числе антигены, рестриктированные молекулами МНС класса I и II, например, тирозиназу и gp100 для меланомы, и «революционизировал» поствакцинальный мониторинг противоопухолевых иммунных реакций (технологии на основе тетрамер и ELISPOT). Однако определение HLA гаплотипа пациентов и широкая специфичность быстро мутирующих опухолевых клеток часто ограничивает клиническую эффективность узко специфических пептидных вакцин. Вместе с тем открытие новых иммуногенных пептидов способствуют дальнейшему изучению биологии злокачественных опухолей и выбору ключевых антигенов для будущих противоопухолевых вакцин.
Оптимальной моделью в разработке противоопухолевых вакцин может оказаться детерминированная идиотипическая экспрессия антигенов трансформированными В-клетками. Исследования на экспериментальных животных показали, что иммунизация идиотипическими белками–продуктами гибридизированных опухолевых клеток может индуцировать защитный иммунный ответ, направленный против перевиваемой опухоли. Исследования на приматах демонстрируют эффективную иммунизацию с высоко иммуногенным белковым носителем, таким как гемоцианин моллюска фиссуреллии (Keyhole limpet haemocyanin - KLH), действие которого сходно с эмульсией в адъюванте Фрейнда. Эти вакцины были положены в основу клинического исследования 41 пациента с В-клеточными лимфомами различных идиотипических характеристик. У 20 вакцинированных пациентов обнаружены идиотип-специфические антитела и/или наблюдался пролиферативный Т-клеточный ответ. У больных с поствакцинальным идиотипическим иммунным ответом наблюдались лучшие клинические результаты в первую ремиссию.
Индукция иммунного ответа, направленного против слабых ОАА, может быть увеличена с помощью иммунологического адъюванта, вызывающего неспецифическую активацию иммунной системы. Но многие адъюванты не разрешены для использования у людей, так как обладают токсическими эффектами. Использование же других методов, увеличивающих иммуногенность вакцины, становится обязательным. Иммунизация идиотипическим белком-KLH в смеси с растворимым ГМ-КСФ пациентов с В-клеточными лимфомами способствовала образованию опухоль-специфических CD4 + и CD8 + Т-клеток у 19 из 20 пациентов, и у 8 из 11 больных с минимальной остаточной болезнью впоследствии развилась молекулярно-генетическая ремиссия (Bendandi M. et al., 1999).
В настоящее время ведущая роль в индукции адоптивного и врожденного противоопухолевого иммунного ответа отводится ДК как «высокопрофессиональной антиген-презентирующей системе» и системе «естественных адъювантов». На их основе разрабатываются вакцины, проводятся экспериментальные и клинические исследования во всех онкологических центрах мира.
ДК являются чрезвычайно интересной мишенью для терапевтических манипуляций иммунной системой, способной изменить соотношение «опухоль – организм хозяина» в пользу хозяина и увеличить силу иммунного ответа, направленного на опухоль. Однако сложность системы ДК требует исключительной ответственности и осторожности при манипуляции с этими клетками, а расширяющееся использование вакцин на основе ДК у больных злокачественными опухолями – стандартизации методов получения, активации, способа вакцинации, клинической и иммунологической оценки.
Успехи противоопухолевой вакцинотерапии по всей вероятности будут обусловлены дальнейшим прогрессом молекулярной биологии и изучением поствакцинального иммунитета, так как многие так называемые ОАА экспрессированы в опухолях и нормальных тканях, и это вызывает беспокойство. Аутоиммунная деструкция меланоцитов является косметическим дефектом и не сопровождается значительными клиническими проявлениями, но аутоиммунная реакция в кишечнике или легких может представлять угрозу для жизни.
Результаты исследований с агонистом CTLA-4 антител у пациентов с меланомой установили, что аутоиммунная реакция как осложнение противоопухолевой вакцинотерапии может развиваться значительно чаще ожидаемой. Поэтому тщательный мониторинг на предмет этого осложнения является неотъемлемой частью токсикологического мониторинга во всех планируемых клинических исследованиях.
Таким образом, исследования последних лет убедительно демонстрируют тот факт, что разработка современных подходов вакцинотерапии злокачественных опухолей является актуальным направлением в онкологии и основана на изучении молекулярно-генетических механизмов противоопухолевого иммунитета. Прогресс в этой области может быть связан с дальнейшим изучением биохимических особенностей МНС молекул и разработкой биоинформационных алгоритмов, которые позволят с высокой долей вероятности прогнозировать разнообразие клонов ЦТЛ, обладающих высокой аффинностью к опухолеассоциированным белкам и индивидуальным МНС молекулам I и II класса.
Опухолевые антигены
Многие опухолевые клетки синтезируют антигены, которые могут высвобождаться в системный кровоток или экспонироваться на поверхность клетки. Любая молекула, распознаваемая иммунной системой, рассматривается как антиген. Были определены антигены для большинства видов рака человека, включая лимфому Беркитта Лимфома Беркитта Лимфома Беркитта является агрессивной В-клеточной лимфомой, возникающей у детей и взрослых. Выделяют эндемическую (африканскую), спорадическую (неафриканскую) и связанную с иммунодефицитом формы. Прочитайте дополнительные сведения , остеосаркому Остеосаркома (остеогенная саркома) Первичные опухоли костей встречаются значительно реже, чем метастатические опухоли костей, особенно у взрослых. К первичным опухолям костей относятся множественная миелома, остеосаркома, адамантинома. Прочитайте дополнительные сведения , рак простаты Рак простаты Рак простаты обычно представлен аденокарциномой. Как правило, симптомы отсутствуют, пока рост опухоли не вызывает гематурию и/или обструкцию и боль. Диагноз обычно заподозривают по результатам. Прочитайте дополнительные сведения , карциному легких Легочная карцинома Рак легких является основной причиной смерти от рака во всем мире. В 85% случаев причиной заболевания становится курение. К симптомам рака легкого относится кашель, дискомфорт или боль в грудной. Прочитайте дополнительные сведения . Ключевая роль иммунной системы заключается в обнаружении этих антигенов и последующей таргетной эрадикации. Однако несмотря на их инородную структуру, иммунный ответ на опухолевые антигены варьирует и зачастую недостаточно выражен, чтобы препятствовать росту опухоли (см. также Ответ организма на развитие опухоли Ответ организма на развитие опухоли Иммунный ответ на чужеродные антигены включает: Гуморальные механизмы (напр, антитела) Клеточные механизмы (См. также Опухолевые антигены [Tumor Antigens]). В большинстве случаев гуморальный. Прочитайте дополнительные сведения ).
Опухоль-ассоциированные антигены (ОАА) лишь относительно специфичны для опухолевые клеток.
Опухоль-специфические антигены (ОСА) являются уникальными у опухолевых клеток.
ОСА и ОАА обычно представляют собой фрагменты внутриклеточных молекул, экспрессирующиеся на поверхность клетки в составе главного комплекса гистосовместимости.
К предположительным механизмам формирования опухолевых антигенов относят:
Внедрение новой генетической информации с вирусными частицами (например, белки папилломавируса человека Е6 и Е7 при раке шейки матки)
Изменение канцерогенами онкогенов или генов, подавляющих опухоли, что приводит к образованию неоантигенов (новые последовательности белков или накопление белков, которые в норме не экспрессируются или экспрессируются в очень малых количествах, такие как ras или p53) путем непосредственого образования новых последовательностей белков или индуцирования их накопления
Развитие миссенс-мутаций в различных генах, не имеющих непосредственной связи с опухолевыми супрессорами или онкогенами и вызывающих появление опухоль-специфических неоантигенов на поверхности клетки
Развитие аномально высокого уровня протеинов, которые в норме присутствуют в гораздо меньших количествах (например, простат-специфический антиген, меланома-ассоциированные антигены) или экспрессируются только в период эмбрионального развития (раковый эмбриональный антиген)
Экспонирование антигенов, в норме скрытых в клеточной мембране, в связи с нарушением гомеостаза мембраны в опухолевых клетках
Высвобождение антигенов, в норме заключенных внутри клетки или ее органелл, при гибели опухолевой клетки
Справочные материалы
3. Snyder A, Makarov V, Merghoub T, et al: Genetic basis for clinical response to CTLA-4 blockade in melanoma. New Engl J Med 37:2189–2199, 2014. doi: 10.1056/NEJMoa1406498
4. Van Allen EM, Miao D, Schilling B, et al: Genomic correlates of response to CTLA-4 blocker in metastatic melanoma. Science 350:207–211, 2015. doi: 10.1126/science.aad0095
Авторское право © 2022 Merck & Co., Inc., Rahway, NJ, США и ее аффилированные лица. Все права сохранены.
Ki-67 (MIB-1) экспрессия, иммуногистохимическое исследование (оценка пролиферативной активности по экспрессии Ki-67 (MIB-1); Ki-67 (MIB-1) by Immunohistochemistry, IHC)
Метод определения Гистологическое исследование биоптатов опухоли согласно гистологической классификации ВОЗ с окрашиванием гематоксилином-эозином. Иммуногистохимическое исследование индекса пролиферативной активности с применением моноклональных антител к Ki-67 (MIB-1) (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).
Комплексное исследование биоптатов, включающее морфологическое описание и оценку пролиферативной активности клеток, которое используют в целях диагностики − определения биологического потенциала новообразований человека.
В современной онкоморфологии ведется поиск критериев, позволяющих верифицировать степень гистологической и биологической злокачественности с максимальной объективностью. Учитывая, что пролиферативная активность клеток опухолей человека коррелирует со степенью их гистологической и биологической злокачественности, в последние годы ИГХ-определение индекса пролиферации при исследовании экспрессии Ki-67 (MIB-1) является необходимым рутинным исследованием при онкологических заболеваниях.
Специфичным и оптимальным для широкого использования в патологоанатомической практике маркером пролиферации является антиген Ki-67. Ядерный антиген Кi-67 впервые описан Gerdes и соавторами в 1983 году, он состоит из двух полипептидных цепей с молекулярной массой 345 и 395 кДа. Это основная часть нуклеарного матрикса, в течение интерфазы ассоциированная с хромосомами фазы митоза. Ki-67−димерная молекула, имеющая тесную связь с 10-й хромосомой, конкретная роль этого протеина в процессе клеточного деления до сих пор точно не выяснена. Экспрессия Кi-67 позволяет выделить опухолевые клетки, находящиеся в активной фазе клеточного цикла, на всём его протяжении (G1-, S-, G2- и M-фазы). Кi-67 отсутствует только в G0-периоде. Активно пролиферирующие опухолевые клетки представляют собой «фракцию роста» новообразования. Пролиферативная активность является ведущим фактором как в механизме злокачественной трансформации клеток, так и в биологическом поведении уже возникших опухолей. Это одна из наиболее важных характеристик фенотипа опухоли, в значительной степени определяющая скорость роста новообразования, риск метастазирования, потенциальный ответ на лечебные мероприятия и исход онкологического заболевания. Многие факторы, влияющие на течение и исход онкологических заболеваний, свое патогенетическое действие на опухоль опосредуют через изменение пролиферативной активности.
Оценивать пролиферативную активность опухолевых клеток необходимо не только для определения биологических характеристик опухолей, но и для селективного подхода к выбору терапии.
Индекс пролиферативной активности в различных опухолях имеет разные значения, являясь при этом независимым прогностическим признаком, определяющим клиническое течение и прогноз заболевания. При Ki-67 менее 15% опухоль считается менее агрессивной, при показателе более 30% опухоль считается высоко агрессивной. При высоком уровне (выраженном в %) Ki-67 опухоль с более высокой вероятностью ответит на химиотерапевтическое лечение. При низком его уровне опухоль, например, молочной железы, при определённых условиях лучше отреагирует на гормонотерапию.
определяет лечащий врач. Материал для исследования: биоптат опухоли, фиксированный в забуференном 10%-м растворе формалина (№5111) или в парафиновом блоке (№5222).
О теоретических принципах иммунотерапии рака
![Обложка]()
В настоящее время принято считать, что опухолевые клетки являются иммунологически чужими для организма опухоленосителя.
Ключевые слова
Полный текст
В настоящее время принято считать, что опухолевые клетки являются иммунологически чужими для организма опухоленосителя. Это доказано прежде всего тем, что вырезанная опухоль при повторной имплантации отторгается [5, 22]. В опухолях самого различного происхождения обнаруживают антигены, которых нет в нормальных клетках, давших начало опухолевому росту. В основном появление этих антигенов связано с активацией генов, которые в нормальных клетках репрессированы, что согласуется с гипотезой, согласно которой рак рассматривается как результат активации клеточного онкогена. Возможно, что белок, кодируемый онкогеном, является фактором роста клеток [18].
Антигены опухоли могут имитировать антигены бактерий и вирусов, инфицирующих опухоль [5, 18]. Для опухолей характерны также антигенное упрощение, то есть исчезновение некоторых нормальных антигенов [16, 22, 39] и гетерогенность [40].
В организме опухоленосителя В-лимфоцитами образуются антитела к опухолевым антигенам и развивается Т-клеточная сенсибилизация, проявляющаяся в иммунной реакции замедленного типа в ответ на внутрикожное введение опухолевых антигенов [7, 23]. Некоторые иммунные реакции в отношении опухолевых или связанных с опухолью антигенов обнаруживаются и у лиц, контактирующих с больными [36]. Происхождение этого эффекта пока не выяснено, но горизонтальная передача онкологического заболевания эпидемиологически не подтверждается. Иммунодиагностику рака дают возможность проводить и опухолевые антигены, и антитела.
Таким образом, опухоль организмом распознается, но не уничтожается. Однако это положение не абсолютно. Описано много примеров спонтанной регрессии развившихся опухолей, что связывают с деятельностью иммунной системы. Существуют предположения, подтвержденные большим количеством экспериментальных данных, что в организме происходит постоянное образование и разрушение злокачественных клеток и их микроочагов, и только при повреждении иммунного надзора вырастает злокачественная опухоль. При иммуносупрессиях различного типа (тимэктомия, облучение, химиотерапия, заболевание иммунной системы) возрастает частота возникновения спонтанных и экспериментальных опухолей [22, 26].
В норме иммунологически несовместимая ткань не отторгается в двух случаях: при беременности и развитии толерантности, когда благодаря деятельности Т-супресеорных лимфоцитов не происходит выработки антител на определенные антигены.
Причины роста иммунологически несовместимых злокачественных опухолей пока не выяснены, хотя есть точка зрения, что раковая опухоль использует такие же механизмы защиты от иммунитета, как и эмбрион [4, 45]. Показано, что антитела к раковоэмбриональному антигену обнаруживаются не только у онкологических больных, но и у беременных женщин [7]. В то же время известно, что при совместной трансплантации эмбриональная ткань отторгается, а опухолевая продолжает расти [21].
Предполагается наличие нескольких механизмов, вследствие которых опухоли удается избежать иммунной атаки со стороны организма опухоленосителя.
- Иммунодепрессивное действие канцерогенных факторов, вызванных появлением опухоли. Действительно, таким действием обладают многие онковирусы и химические канцерогены [И, 22]. Иммунореактивность у больных со злокачественными новообразованиями ниже, чем у здоровых людей [7].
- Выделение самой опухолью или инфильтрирующими ее клетками иммунодепрессоров, например простагландинов [49], кейлонов [11], полиаминов [4] и ряда неизвестных еще факторов. Показано, что макрофаги опухолей ингибируют активность лимфоцитов-киллеров в отношении опухолевых клеток [34], а лимфоциты опухоли подавляют активность лимфоцитов крови людей, иммунизированных к опухолевым клеткам [6].
- Наличие барьера из фибриноидной пленки, защищающей опухолевые клетки от иммунных лимфоцитов [4].
- Затруднение распознавания лимфоцитами антигенов вследствие наличия антител, находящихся на поверхности опухолевых клеток [4, 11].
- Индуцирование антигенами опухоли или их комплексами с антителами толерантности к опухолевым антигенам и выработки специфических Т-супрессоров [37, 42].
- Изменение опухолью своего антигенного спектра для предупреждения возникновения специфической иммунной реакции (по подобию паразитирующих простейших) [41, 51].
Несомненно, что, выяснив действие указанных выше механизмов, онкологи смогут найти мощное иммунотерапевтическое средство. В настоящее время наибольшие достижения иммунотерапии опухолей связаны с сугубо эмпирическими наблюдениями, начало которым положил Буш еще в 1868 г. Им была описана регрессия неоперабельных сарком у двух пациентов с присоединившимся рожистым воспалением. В дальнейшем с переменным успехом в онкологической практике использовался препарат «Токсин-Коли», состоящий из убитых теплом стрептококков, возбудителей рожистого воспаления. В те времена эти манипуляции носили название «биотерапия» а в настоящее время ясно, что мы имеем дело с неспецифической активной иммунотерапией рака.
Микроорганизмы или продукты их жизнедеятельности широко применяются в иммунотерапии. С 1956 г. в США на противоопухолевую активность исследовано 180 000 фильтратов из микроорганизмов и у 8,5% из них выявлена искомая активность [33]. Особое .место в специфической иммунотерапии с помощью микроорганизмов занимает вакцина БЦЖ. Ее использованию в онкологии был посвящен специальный симпозиум, состоявшийся в США в декабре 1972 г.
Научный интерес онкологов к БЦЖ не пропал и сейчас, хотя следует указать, что «она не оправдала больших надежд. Данные об эффекте БЦЖ-терапии оказались весьма противоречивыми. Пока остается неясным, чем это обусловлено: индивидуальными различиями пациентов и опухолей, дозировкой или временем введения [46]. Результативность БЦЖ и других вакцин существенным образом зависит от времени применения препарата. Установлено, что при введении вакцин через 5—7 дней после трансплантации опухолей в половине случаев достигается полная регрессия, а при введении в более поздние сроки результаты получаются менее эффективными [51]. И в опытах на животных [19], и в клинике [48] показано, что предварительная сенсибилизация к туберкулину повышает противоопухолевый эффект БЦЖ-иммунотерапии, однако это характерно не для всех антигенов. Так, по данным В. В. Городиловой и М. Н. Боевой (1983), у больных раком молочной железы, имеющих резко положительную реакцию замедленной гиперчувствительности с -опухолевым антигеном, выживаемость ниже, чем у Лиц с отрицательной реакцией, хотя тот же антиген использовался для иммунопрофилактики метастазов и рецидивов. По данным Розенталь (1983), уровень заболеваемости злокачественными опухолями ниже среди людей, вакцинированных БЦЖ в период новорожденности.
По-видимому, об иммунном механизме следует говорить только в том случае, если нет существенной разницы в действии живых, ослабленных или убитых теплом микроорганизмов. Если же такая разница существует и живые микроорганизмы обладают значительным преимуществом в противоопухолевом действии, то на первый план выступает биотерапевтический эффект, связанный с непосредственным инфицированием опухолевых клеток или с выделением микроорганизмами в процессе жизнедеятельности противоопухолевых факторов. Выраженным биотерапевтическим действием обладают трипанозомы. Они способны размножаться в опухолевых клетках, а также синтезировать и выделять в среду противоопухолевый фактор [13]. Таким же свойством наделены некоторые лептоспиры [43] и вирусы [50]. Вероятно, микроорганизмы с биотерапевтическим действием следует искать среди анаэробов, поскольку в опухолевых клетках содержание кислорода снижено [14].
К неспецифической активной иммунотерапии следует отнести воздействие вытяжками из селезенки, зобной железы, костного мозга [21], печени акулы, а также различные полисахариды, интерферон, конканавалин А, витамины, яды кобры и жабы [7] и т. А.
Из новых средств следует упомянуть туфтзин, выделенный из константной части иммуноглобулинов [7], и полипептиды, полученные из тимуса, эпифиза и гипоталамуса [1].
Механизмы активного неспецифического иммунотерапевтического действия весьма разнообразны и часто непонятны. Наряду с активацией макрофагов, Т-киллеров, Т- лимфоцитов, В-лимфоцитов [16, 46] наблюдается выделение ими опухоленекротических факторов и участие адренергических и ацетилхолиновых рецепторов, механизм действия которых пока еще неясен [27].
Действие БЦЖ реализуется через макрофаги, которые активизируются и выделяют в кровь фактор некроза опухолей [30]. Подобный механизм иммунотерапии отмечен и у некоторых других микроорганизмов и их экстрактов. Однако и здесь большое и часто необъяснимое значение имеют дозировка, время, место введения препарата. Так, Н. Н. Трапезников и 3. Г. Кодогидзе (1982) показали, что при длительном введении БЦЖ стимулируются Т-супрессорные клетки, что может благоприятствовать росту опухоли. Предполагается, что иммунотерапевтический эффект зависит От количественного соотношения различных иммунных клеток.
Особый интерес представляет действие микроорганизмов, имеющих общие антигенные детерминанты с опухолевыми клетками. Н. Н. Жуков-Вережников и соавт. (1981) установили, что сыворотка кроликов, иммунизированных БЦЖ, агглютинирует опухолевые клетки.
Л. В. Белецкая и соавт. (1981) в клетках эпидермальных опухолей выявили антигены, перекрестно реагирующие со стрептококковыми. По данным Е. В. Монце- вичюте : Эрингене (1980), в процессе канцерогенеза появляются антитела к общему энтеробактериальному антигену.
Большую работу в этом направлении проводит группа украинских исследователей под руководством Д. Г. Затулы [9, 10]. Они обнаружили антигенное сходство между почвенной Вас. megateriuni Н. и клетками злокачественных опухолей. Подобные антигены не выявляются в нормальных тканях, а сыворотки крови онкологических больных в 90—100% случаев вызывают иммунную флюоресценцию этих бактерий. В эксперименте продолжительность жизни мышей-опухоленосителей, иммунизированных бактериями Вас,- megaterium Н., увеличивалась в среднем втрое.
Исследуя частоту аллергических кожных реакций на токсоплазмин среди здоровых и больных с раком молочной железы и мелонобластомой, мы также предположили, что возбудитель токсоплазмоза имеет антигенное сходство с опухолевыми клетками. Позднее такая возможность была подтверждена [44] фактом нарастания титра антител к Тох. gondii у больных гранулоцитарной лейкемией, а также тем, что хронический токсоплазмоз предотвращает развитие экспериментальных опухолей у мы-
Какое значение имеет обнаруженное сходство Между антигенами микроорганизмов и опухолевых клеток? Не является ли оно следствием ретроэволюции к одноклеточным [18] и как его можно применять в иммунотерапии, опухолей? Вот ряд вопросов, требующих решения в настоящее время.
В тех случаях,, когда противоопухолевый эффект этих микроорганизмов связан с антигенным сходством, а именно: антитела, вырабатываемые к микроорганизмам, специфически взаимодействуют и с опухолевыми клетками, мы имеем дело, по-видимому, со специфической активной иммунотерапией рака. Такая терапия в чистом виде предполагает введение опухолевых антигенов и усиление специфической по отношению к опухолевым клеткам иммунной реакции со стороны опухоленосителя. Так, С. А. Мисек (1980) показал, что введение внутрикожно Живых, опухолевых клеток повышает устойчивость организма к данной опухоли. Этот Способ иммунотерапии предлагается применять после оперативного удаления основной массы опухоли. Таким же эффектом обладают облученные опухолевые клетки [51]. Но оказалось, что если в подобных экспериментах опухоль приживалась, то ее клетки становились устойчивыми к действию Т-лимфоцитов in vitro [28]. Активная специфическая иммунотерапия рака с помощью антигена, выделенного из опухолей молочных желез, была применена для лечения этих же опухолей [7].
Согласно схеме адоптивной иммунотерапии, устойчивость к опухоли, выработанная в процессе специфической иммунизации, может быть передана другому организму с помощью иммунных клеток, сыворотки (антител) или РНК селезенки.
Механизм действия РНК не совсем ясен и, возможно, его следует отнести к активному иммунному воздействию, так как в конечном итоге 1?йецифические противоопухолевые иммунные лимфоциты дифференцируются из клеток реципиента. В настоящее время для РНК введен новый термин — «адоптивная иммунотерапия» [40]. Многократно подтверждено, что РНК, выделенная из лимфоидных органов опухоленосите- лей или иммунизированных опухолевым антигеном животных, тормозит развитие этих же опухолей у РНК-реципиентов [3, 12, 38]. Причем, что очень важно, видовая принадлежность донора и реципиента не имеет значения. Эта иммунная РНК находится в цитоплазме лимфоидных клеток в максимальном количестве на 7—14-й день после начала иммунизации животного [38]. Она индуцирует у лимфоцитов реципиента специфическую противоопухолевую цитотоксичность [3]. В дозах, применяемых в иммунотерапии, препараты РНК не токсичны [12], и в настоящее время к ним привлечено внимание многих исследователей.
Пассивная специфическая иммунотерапия проводится введением донорских антител и с помощью сенсибилизированных клеток. В клинике инкубировали при 37 е - в течение недели лейкоциты больного и ткань его же опухоли [24]. При обратном введении лейкоцитов больному в 50% случаев была получена регрессия опухолей.
Различные виды иммунотерапии часто более эффективны в комплексе как друг с другом, так и с иными способами лечения (химиотерапия, облучение, хирургия). В некоторых случаях примененные в отдельности методы терапии могут вообще не оказать положительного действия, однако в комплексе бывают достаточно эффективными [32, 35].
Негативной стороной иммунотерапии опухолей предстает возможность возникновения эффекта, стимулирующего рост опухоли. В некоторых случаях было показано, что стимулирующий эффект связан также со специфическими противоопухолевыми антителами и может переноситься с помощью сыворотки, а в других — более важное значение отводится Т-супрессорным клеткам [15]. Несмотря на то, что иммунные средства менее токсичны, чем химиопрепараты, их применение далеко не безопасно. Осложнениями, например, БЦЖ-иммунотерапии могут стать анафилактический шок, развитие побочных инфекций, сепсис. Побочными эффектами ширрко известного лева- мизола являются головокружение, кожные высыпания, повышение температуры и даже судороги. Многое зависит от индивидуальности больного и места введения дозы.
Можно предположить, что эффект иммунотерапии в большей степени зависит от состояния системы опухоль-организм, однако утверждать это мы пока не имеем возможности — необходима дальнейшая совместная работа онкологов и иммунологов. В то же время не вызывает сомнений, что иммунотерапия может стать действенным, если не ведущим, методом лечения и профилактики злокачественных опухолей.
Читайте также:
