Фенотипическая гетерогенность. Примеры
Обновлено: 17.05.2024
Выраженная гетерогенность гепатоцитов по количеству и степени изменений органелл и плотности цитоплазматического матрикса.
The expressed heterogeneity of hepatocytes in the number and degree of changes in the organelles and density of the cytoplasmic matrix.
Генетическая гетерогенность этого заболевания объясняет хорошо известный врачам его клинический полиморфизм.
Однако это невозможно сделать перорально, учитывая межиндивидуальную гетерогенность фармакокинетики каннабиноидов у пациентов с дисфункциональным метаболизмом и измененным составом тела.
However, it is not possible with oral dosing, considering the inter-individual heterogeneity in pharmacokinetics of cannabinoids in patients with dysfunctional metabolism, and altered body composition.
Определена аллельная и локусная гетерогенность популяций и этнических групп РФ для многих наследственных болезней.
Allele and locus heterogeneity of populations and ethnic groups of the Russian Federation for many hereditary diseases is identified.
ДозировкаУчитывая гетерогенность и мультисистемную природу болезни Гоше, дозу устанавливают индивидуально после клинической оценки всех проявлений заболевания.
Given the heterogeneity and multisystem nature of Gaucher disease, the dose is set individually after a clinical evaluation of all manifestations of the disease.
Рассмотрены фенотипическая гетерогенность заболевания и его основные клинические проявления, обновленные Бостонские диагностические критерии.
The phenotypic heterogeneity of the disease and its main clinical manifestations are considered; the updated Boston diagnostic criteria are formulated.
Молекулярная и иммунохимическая гетерогенность ЛПНП определенным образом связана с атерогенезом и может служить дополнительным критерием его оценки.
In a certain manner, molecular and immunochemical heterogeneity of VLDLP is connected with atherogenesis and can serve as a additional criterion of its evaluation.
Высокая генетическая гетерогенность была выявлена обнаружением этих ВКК в 67 различных регионах у 9% пациентов.
High genetic heterogeneity was revealed by the detection of these CNVs at 67 different regions in 9% of patients.
Статистическая гетерогенность измерялась с использованием I2 статистических методов и I2 статистики с применением набора значимости при I2, превышающей 50%.
Statistical heterogeneity was measured using statistic and statistic with significance set at greater than 50%.
Действительно, в 1912 году биолог Джулиан Хаксли определил сложность как «гетерогенность частей», то есть своего рода функциональную неделимость.
Indeed, the biologist Julian Huxley, in 1912, defined complexity in terms of 'heterogeneity of parts', by which he meant a particular kind of functional indivisibility.
Гетерогенность предпочтений представлена в описанной выше теории Даймонда-Брюкнера (Brueckner, 2006).
Heterogeneity of preferences is presented in the abovementioned Diamond-Brueckner model (Brueckner, 2006).
Множественность и гетерогенность (трансгрессия) оказываются у него подчинены доминирующей перспективе тождества (трансценденция).
Plurality and heterogeneity (transgression) at it are subordinated to the dominating prospect of identity (transcendence).
Кроме того, гетерогенность механизмов МА определяет разные (терапевтические и хирургические) стратегии лечения таких пациентов.
In addition, heterogeneity of AF mechanisms determines different (therapeutic and surgical) strategies of therapy in such patients.
CTCs, как считается, происходят из первичной опухоли и приобрели генетическую гетерогенность в процессе эволюции.
CTCs are believed to originate from the primary tumor and obtain genetic heterogeneity during evolution.
Гетерогенность популяции
Все природные популяции гетерогенны, т.е. состоят из особей, отличающихся между собой по фенотипу и (или) генотипу.
Фенотипическое и генотипическое разнообразие организмов в составе популяций повышает эффективность использования ими ресурсов. Кроме того, у разных организмов отличается и устойчивость к неблагоприятным факторам среды.
Гетерогенность популяции во многом определяется внутрипопуляционной конкуренцией, которая способствует повышению разнообразия и попыткам расширить свою экологическую нишу. При резком преобладании внутривидовой конкуренции над межвидовой возможно симпатричное видообразование в результате дизруптивного отбора.
Типы гетерогенности популяций
Половое размножение организмов, обеспечивающее появление новых сочетаний генов, в совокупности с мутационным процессом приводит к тому, что в природных популяциях каждая особь обладает уникальным генотипом.
Отличия в этом плане могут быть как незначительными, так и довольно большими, нередко они имеют приспособительное значение, или приобретают его при изменении условий среды. В связи с явлением доминантности и рецессивности генов, нередко различные генотипы соответствуют четко выраженным фенотипам, без промежуточных особей.
Генотипическое разнообразие особей в популяциях ставит особые задачи перед охраной биоразнообразия, поскольку необходимо сохранение не только всех видов, но и внутривидовых экотипов.
В $XX$ веке, при массовом изучении генетики популяций у самых разных организмов были выявлены так называемые «виды-двойники», обладающие разными генотипами и неспособные скрещиваться, но идентичные фенотипически. Такие организмы в генетике считаются настоящими видами (с позиций «биологической концепции вида»), забывая о том, что главная характеристика вида – это не способность скрещиваться с другими, а наличие специфичной для него экологической ниши, т.е. способа использования ресурсов.
Фенотипическая гетерогенность популяции может быть выражена в виде полиморфизма, когда существует две или более четко выраженных морфологически форм. Они могут быть хорошо обособленными одна от другой, либо связаны постепенными переходами. В других случаях особи в популяции довольно сходны фенотипически, и их некоторые различия можно обнаружить лишь путем специальных промеров.
У многих организмов широко развита модификационная изменчивость, когда особи с одним и тем же генотипом могут выглядеть (а у животных – и вести себя) совершенно по-разному, в зависимости от условий, в которых они росли. Например, у растений взрослые особи одного и того же вида могут отличаться по линейным размерам в сотни, а по массе – в тысячи раз. У животных также имеются особые формы, например, стадная и одиночная саранча, в формировании того или иного фенотипа большое значение имеет гормональный фон, обусловленный плотностью популяций, особенностями социальных контактов и т.д.
Одним из вариантов фенотипической гетерогенности является возрастная гетерогенность популяции, обусловленная присутствием в ней особей разного возраста. Нередко такие особи относятся и к разным жизненным формам. Например, это травянистые проростки деревьев, водные личинки амфибий – головастики и т.д.
В популяциях животных обычна поведенческая гетерогенность. Особи обладают различной организацией нервной системы, разным индивидуальным опытом, кормовыми предпочтениями, толерантностьь к конспецифичным особям и животным других видов, в том числе хищникам. Все это способствует неодинаковой реакции разных особей на одни и те же раздражители, что приводит к их дифференцированному выживанию, и большей устойчивости гетерогенной популяции в целом, по сравнению с гипотетическим гомогенным ее вариантом.
Глава 6. Общая характеристика популяции
Б.М. Миркин, Л.Г. Наумова
Основы общей экологии
Учебное пособие. М.: Университетская книга, 2005.
6.5. Гетерогенность популяций
Любая природная популяция гетерогенна, т.е. состоит из особей, различающихся по фенотипическим и (или) генотипическим признакам.
Одна из форм фенотипической гетерогенности – присутствие в популяции особей разного возраста (разных возрастных когорт). Однако даже в составе одной возрастной когорты могут быть индивидуумы, развитые лучше и хуже, т.е. обладающие разным виталитетом (Злобин, 1993, 1994). Наиболее доступным и информативным показателем виталитета у растений является их размер (вес): чем растение лучше развито, тем выше его виталитет.
Фенотипическая дифференциация животных не столь наглядно выражена, как у растений, тем не менее в их популяциях возникают «социальные структуры» – семейные группы, в которых дифференцируются процветающие, средние и слабые особи. Лидеры семейных групп всегда отличаются более мощным сложением, которое позволяет им легче отстаивать свои права на лучшие условия. Как правило, слабые особи оказываются оттесненными к периферии группы и становятся добычей хищников.
Фенотипическое разнообразие организмов в популяциях повышает полноту использования ресурсов (даже стадо из коров и телят полнее использует травостой пастбища, чем стадо только из коров или только из телят).
В популяциях растений часто отмечается значительная генотипическая вариация за счет сосуществования нескольких экотипов, которые определяются как «…внутривидовые генетически предопределенные локальные соответствия между организмами и средой» (Бигон и др., 1989, т. 1, с. 49).
Удивительные примеры сосуществования экотипов клевера ползучего были выявлены Р. Теркингтоном и Дж. Харпером (Turkington, 1978; Turkington, Harper, 1979). Клевер ползучий легко размножается вегетативно, авторы клонировали особи клевера, которые произрастали рядом с разными злаками (ежой сборной, бухарником, райграсом многолетним и др.). Как оказалось, отношения соседства привели к тонкой биотической дифференциации – отбору особых экотипов клевера, которые в культуре «узнавали» своего соседа и отвечали на это усилением роста.
В последние годы большой материал о генотипическом разнообразии внутри популяций растений получен методами изоферментного анализа (изоферментных генетических маркеров). В частности, было выявлено, что в большинстве популяций древесных растений отмечается достаточно высокое генотипическое разнообразие, возрастающее в экстремальных условиях у границ экологического ареала вида.
Генотипическая вариация в популяциях некоторых видов животных, видимо, ниже, чем в популяциях растений, так как, обладая подвижностью, животные разных экотипов распределяются по популяциям или микросайтам внутри одной популяции. В то же время отмечены случаи сосуществования в одной популяции животных нескольких (чаще двух) экотипов у малоподвижных видов, таких, как улитки (Бигон и др., 1989). В популяциях саранчей есть две формы, резко отличающиеся по внешнему виду – «стационарная» (одиночная) и мигрирующая (стадная), причем соотношение этих форм меняется в зависимости от условий года.
Генотипическая гетерогенность популяций, также как и фенотипическая, повышает эффективность использования ресурсов и способствует повышению продуктивности и устойчивости. Например наличие в составе популяции растений раннецветущего и позднецветущего экотипов повышает ее устойчивость к заморозкам, наличие экотипа, более активно накапливающего цианиды – устойчивость к фитофагам и т.д.
Гетерогенность природных популяций моделируется в практике сельского хозяйства: используются смеси из нескольких сортов культурных растений с разными экологическими особенностями (более засухоустойчивого и менее засухоустойчивого, высокого и низкого и т.д.). Такие смеси сортов дают более устойчивый урожай, хотя в отдельные годы, наиболее благоприятные для одного или другого сорта‑экотипа, его урожай в чистом посеве может быть выше.
Наличие экотипов, устойчивых (преадаптированных) к действию гербицидов, объясняет феномен быстрого «приспособления» сорных видов к химическим мерам контроля их популяций. Подобные экотипы могут отбираться и по устойчивости к загрязнению почвы тяжелыми металлами.
Генотипическое разнообразие внутри популяций ставит дополнительные задачи перед охраной биоразнообразия, которая должна обеспечивать сохранение не только видов, но и их экотипов.
1. Какую роль играет фенотипическая дифференциация особей в популяциях растений и животных?
2. Почему генотипическая дифференциация особей в популяциях растений обычно выше, чем в популяциях подвижных животных?
3. Как используется свойство гетерогенности популяций в сельском хозяйстве?
Биология и медицина
Генетическая гетерогенность наследственных заболеваний
Если определяющая роль в патогенезе заболевания принадлежит одному гену, но этот ген в разных семьях разный, то говорят о генетической гетерогенности. Одна и та же фенотипическая картина может быть обусловлена мутациями в различных генах. Генетическая гетерогенность - явление, характерное почти для любого наследственного заболевания человека. При картировании генетическая неаллельная гетерогенность ведет к тому, что в одной родословной болезнь может косегрегировать с одним генетическим маркером, а в другой - совершенно с другим.
Генетическая гетерогенность характерна для большинства наследственных заболеваний. Ее обусловливают разные мутации одного гена ( аллельная гетерогенность ) или мутации разных генов ( неаллельная гетерогенность , или локусная гетерогенность ).
Например, болезнь Шарко-Мари-Туса , врожденная нейросенсорная тугоухость и пигментная дегенерация сетчатки могут наследоваться как аутосомно-доминантно , так и аутосомно-рецессивно или Х-сцепленно . Обычно причина - неаллельная гетерогенность; но разнообразие аллелей в одном локусе также влияет на характер наследования.
Наследственную метгемоглобинемию , когда-то считавшуюся однородным заболеванием, вызывают по меньшей мере 10 разных мутаций в трех различных локусах: две мутации гена альфа-цепи глобина , три мутации гена бета-цепи глобина и по меньшей мере пять мутаций гена НАДН-дегидрогеназы .
Особенно впечатляет масштаб аллельной гетерогенности. Известно большое число мутаций, которые вызывают гемоглобинопатии , муковисцидоз , семейную гиперхолестеринемию , фенилкетонурию и семейный рак молочной железы типа 1 . Гетерогенность симптомов чаще всего обусловлена разными мутациями в одном гене.
Больные с аутосомно-рецессивными болезнями часто являются смешанными гетерозиготами , то есть у них имеется два разных мутантных аллеля , как, например, при гемоглобинопатии SC или муковисцидозе, обусловленном генотипом дельтаF508/G542Х . Однако при широком распространении в популяции определенных мутантных аллелей или среди детей от близкородственных браков больные обычно гомозиготны, как, например, при серповидноклеточной анемии с генотипом SS или муковисцидозе с генотипом дельтаF508/дельтаF508 .
Многообразие симптомов, обусловленное аллельной гетерогенностью , особенно важно. Например, из-за разной тяжести двух заболеваний - тяжелого летального синдрома Гурлер (мукополисахаридоза типа IH ) и более легкого синдрома Шейе ( мукополисахаридоза типа IS ), поражающего только кости и суставы, - их считали разными наследственными болезнями. На самом деле оба они вызваны недостаточностью альфа-L-идуронидазы . Аналогично, и тяжело протекающая миопатия Дюшенна , и более легкая миопатия Беккера вызваны делециями в одном гене, чаще всего со сдвигом рамки считывания при миопатии Дюшенна и без сдвига рамки считывания при миопатии Беккера. Классическая и легкая формы аденоматозного полипоза толстой кишки проявляются в разном возрасте (разница составляет 15 лет), так что легкая форма заболевания минимально влияет на репродуктивную функцию, но нераспознанные мутантные аллели существенно повышают риск рака толстой кишки .
Известно множество других примеров разнообразия симптомов, обусловленного аллельной гетерогенностью . Классическая картина заболевания часто обусловлена нулевой мутацией , а другие мутации, лишь частично подавляющие функцию генного продукта, вызывают почти непрерывный ряд более легких вариантов болезни. В начале этого ряда находятся мутантные аллели, кодирующие продукты, которые чаще всего не вызывают функциональных отклонений, во всяком случае без дополнительных внешних воздействий. Сюда же относятся и бессимптомные отклонения биохимических показателей. Очевидно, что количество нормального генного продукта, способное предотвратить болезнь, зависит от других наследственных и внешних факторов. Например, больной с доброкачественной метилмалоновой ацидемией попадает в группу риска при большинстве нарушений катаболизма , так что здесь "доброкачественность" - понятие условное. Такие состояния находятся посередине между моногенными и полигенными болезнями .
Фенотипическая гетерогенность. Примеры
ФГБУ "РОНЦ им. Н.Н. Блохина" РАМН, Москва, Россия, 115478
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», ул. Балтийская, 8, Москва, 125315, Российская Федерация
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
Кафедра репродуктивной медицины и хирургии факультета дополнительного профессионального образования ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, Москва, Россия
Синхронные эндометриоидные опухоли матки и яичников. Сложности интерпретации
Журнал: Проблемы репродукции. 2018;24(4): 66‑70
Цель исследования — провести дифференциальную диагностику первично-множественных и метастатических синхронных эндометриоидных злокачественных опухолей яичников и тела матки. Материал и методы. Проведен анализ соматических мутаций в генах CDKN2A, ARID1A, MLH1, ARID5B, FGFR2, CHD4 у 10 больных с синхронной эндометриоидной аденокарциномой яичников и эндометрия. Результаты. У 6 пациенток из 10 отмечена согласованная картина распределения мутационных изменений в образцах эндометрия и яичника в большинстве исследованных локусов, что может указывать на их клональное, т.е. метастатическое происхождение. В то же время в других 4 образцах выявлены гетерогенность и различия мутационных изменений. Выводы. Четкой корреляции между генетическими и морфологическими особенностями всех исследованных нами опухолей яичников и эндометрия не выявлено. Однако это не исключает полностью факт первичности малигнизации именно в эндометрии с метастатическим поражением яичников.
Одной из самых сложных проблем на сегодняшний день для онкологов мира остается рак яичников. По данным Международного агентства по изучению рака (англ. International Agency for Research on Cancer, IARC), ежегодно в мире у 225 500 женщин устанавливают рак яичников и более 140 000 из них умирают. Низкий уровень нашего понимания всех этапов морфогенеза этих опухолей является большим препятствием для ранней диагностики и эффективного лечения данной патологии. Практически не вызывает сомнения, что если источниками герминогенных и стромальноклеточных опухолей являются ткани самого яичника, то происхождение злокачественных эпителиальных опухолей, т. е. рака, еще остается тайной.
Следует особо подчеркнуть, что данные современных исследований подводят нас к мысли о необычайной гетерогенности опухолей яичников. Создается впечатление, что диагноз «рак яичника» на самом деле далеко не отражает истинную картину патогенеза. Совершенно очевидно, что диагноз «рак яичника» — собирательный. Опухоли, поражающие этот орган, сходны только по клиническому течению, но отличаются друг от друга по морфологическим, молекулярным, генетическим, эпидемиологическим характеристикам, прогнозу, эффективности лечения и прочее [1—3].
В связи с этим возникает ряд вопросов. С чем связана такая вариабельность мутаций, происходящих в опухолях? Сочетание двух, практически идентичных опухолей в матке и яичниках — это синхронное заболевание или метастазы из одного органа в другой? Какова роль метаплазии в патогенезе и гетерогенности опухолей? И, наконец, каковы механизм и роль включения клеток мюллеровской системы в опухоли яичников? Последнее, правда, может быть объяснено достаточно интересной теорией, высказанной еще в 1972 г. S. Lauchlan. Автор этой теории предполагает, что кроме основной локализации (шейка матки, матка, фаллопиевы трубы) эпителий, подобный мюллерову («secondary müllerian system»), обнаруживается эктопически также в структуре яичника, инклюзионных, параовариальных кистах, эндосальпингозах, эндометриозах, эндоцервикозах, которые вполне могут стать вероятным источником опухоли [4]. Опираясь на эту теорию, можно, конечно, частично ответить на некоторые вопросы, но, к сожалению, не на все. Тем не менее для клиницистов вопрос первичности эндометриоидного рака достаточно важен, поскольку прогноз заболевания и терапевтические подходы могут быть весьма разными.
Чтобы хоть как-то приблизиться к пониманию механизмов различных вариантов этой патологии, проведено настоящее исследование. В частности работа посвящена эндометриоидному раку матки и яичников.
cинхронный рак (СР) эндометрия и яичников встречается в 5—10% наблюдений [5, 6]. Считается, что на ранних стадиях заболевания и при высокой дифференцировке опухоли ведут себя как две независимые первичные опухоли. Используемые различные методы определения первичности опухоли и/или их метастастазов привели к значительным разногласиям. Некоторые авторы предполагают, например, что большинство высокодифференцированных новообразований эндометрия и яичников являются независимыми первичными опухолями, но с подозрительной оговоркой — если процесс еще не приобрел распространенный характер [7]. Большинство молекулярных исследований не позволили идентифицировать общие молекулярные изменения в исследованных синхронных опухолях. Это, наряду с благоприятным в целом прогнозом этого заболевания, привело к общему мнению о том, что большинство синхронных опухолей являются клониально-неродственными первично-множественными опухолями. Однако эти мнения недавно были поставлены под сомнение независимыми работами, авторы которых исследовали клональную взаимосвязь между синхронно диагностированными карциномами яичников и эндометрия. В результате обнаружено, что большинство (95%) исследованных образцов СР представляют собой первичные опухоли с метастазами [8].
Анализируя результаты лечения больных (n=85) с эндометриоидной аденокарциномой яичников, находившихся в клиниках ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России на протяжении последних 10 лет, мы обнаружили, что в 86% наблюдений эндометриоидный рак яичников сочетался с патологией эндометрия: в 8,2% — с атипической гиперплазией и в 77,6% — с эндометриоидной аденокарциномой тела матки.
Естественно, возник вопрос: являются ли синхронные опухоли эндометрия и яичников первично-множественными злокачественными новообразованиями (ПМЗН) или это метастазы рака эндометрия в яичники?
Следует признать, что на сегодняшний день не существует четких морфологических критериев для выделения первичной множественности опухолевых поражений. Более того, отсутствует общепринятое определение, какие новообразования можно считать первично-множественными. Обращаясь к некоторым частным вопросам гистологической диагностики ПМЗН, необходимо отметить, что гистологические критерии этого диагноза условно можно разделить на абсолютные, относительные и сомнительные.
Абсолютными критериями для установления диагноза ПМЗН являются гистологические признаки опухолей, развившихся из тканей различных зародышевых листков (например, эктодермы и мезодермы, мезодермы и энтодермы, эктодермы и энтодермы); относительными — гистологические признаки опухолей, гистогенетически принадлежащих к одному и тому же зародышевому листку, но имеющих различное гистологическое строение (например, плоскоклеточный рак легкого и аденокарцинома тела матки); сомнительными — гистологические признаки опухолей, имеющих однотипное гистологическое строение, куда и следует отнести синхронные эндометриоидные аденокарциномы тела матки и яичников.
В настоящее время для дифференциальной диагностики первично-множественных опухолей яичников и тела матки морфологи используют критерии, предложенные T. Ulbright и L. Roth (1999), а также критерии R. Scully (2002). К таким критериям относят:
— наличие мультицентрических множественных микроочагов пролиферации и опухолевого роста в яичниках;
— одностороннее поражение яичника;
— локализация опухоли в пределах эндометрия или неглубокая инвазия в миометрий (менее 1/3);
— отсутствие лимфоваскулярной инвазии;
— отсутствие вовлечения в процесс маточных труб;
— присутствие в обоих органах таких морфологических изменений, которые могли бы послужить фоном для развития злокачественной опухоли.
С первого взгляда становится ясно, что вышеперечисленные морфологические признаки не очень убедительны и не позволяют однозначно поставить правильный диагноз, поэтому поиск новых диагностических маркеров с использованием молекулярно-генетического анализа точечных мутаций в генах, ассоциированных со злокачественными новообразованиями эндометрия и яичников, представляется важным направлением в изучении этой проблемы. В доступной нам литературе описаны различные методы молекулярной и иммуногистохимической диагностики с использованием проточной цитофлуорометрии, исследованием феномена потери гетерозиготности, мутаций PTEN/MMAC1, k-ras, p53, A-катенина, микросателлитной нестабильности и прочее [9—12].
Материал и методы
В работе мы исследовали ряд соматических мутаций в генах CDKN2A, ARID1A, MLH1, ARID5B, FGFR2, CHD4, для которых показана высокая частота молекулярно-генетических изменений, приводящих к развитию рака эндометрия и рака яичников.
Нами проанализированы 10 образцов опухолевой и гистологически нормальной ткани эндометрия, а также образцы предположительно метастазов рака эндометрия в яичниках. Все образцы представлены в верифицированных парафинированных блоках, из которых выделили ДНК по стандартной методике фенол-хлороформной экстракции с предварительной очисткой от парафина с помощью ксилола. Выявление мутаций в исследованных генах проводили с помощью анализа кривых плавления. Генотипирование по анализу кривых плавления нуклеиновых кислот высокого разрешения (high-resolution melting analysis, HRMA, HRM-анализ) является простым и достаточно дешевым методом. При выполнении исследования использовали набор qPCRmix-HS SYBR («Евроген», Россия), предназначенный для полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени, с интеркалирующим красителем SYBR Green I, в соответствии с протоколом производителя (Евроген, Россия). ПЦР проводили в 25 мкл реакционной смеси, содержащей 1х qPCRmix-HS SYBR, по 0,4 мкМ каждого праймера (см. таблицу), Условия амплификации при проведении HRM-анализа мутаций генов CDKN2A, ARID1A, MLH1, ARID5B, FGFR2, CHD4 Примечание. П.н. — пары нуклеотидов. 50—100 нг ДНК матрицы; в 96-луночных планшетах Optical Reaction Plate («Thermo Fisher Scientific», Германия) на амплификаторе BioRad CFX96 qPCR System («Bio—Rad», США) по следующей программе: 1 цикл — 95 °C, 5 мин; 40 циклов (95 °С — 30 c; Тотж — 30 с; 72 °C — 30 с), затем 72 °C – 3 мин.
Плавление продуктов амплификации проводили в диапазоне 55—90 °C с увеличением температуры на 0,5 °С каждые 10 с. Обработку полученных данных выполняли с использованием программ, поставляющихся совместно с амплификатором BioRad CFX96 qPCR System («Bio—Rad», США) (см. рисунок). Пример анализа мутации C27106354T в гене ARID1A с использованием кривых плавления. СС, СТ, ТТ — генотипы.
Результаты и обсуждение
При анализе генотипов для 8 локусов 6 исследованных генов методом HRM-анализа в образцах у пациентов с синхронной эндометриоидной аденокарциномой яичников и эндометрия установлено следующее: у 6 из 10 пациенток наблюдалась согласованная картина распределения мутационных изменений в образцах эндометрия и яичника в большинстве исследованных локусов (7—8). Это может указывать на их клональное, т. е. метастатическое происхождение. В то же время в других 4 образцах выявлены гетерогенность и различия мутационных изменений. Это, с нашей точки зрения, отнюдь не позволяет утверждать, что эндометриоидный рак в яичниках первичен. Необходимо отметить, что, согласно современным морфологическим критериям, всем 10 пациенткам установлен диагноз первично-множественный синхронный эндометриоидный рак яичников и рак тела матки. Причем в 7 из 10 наблюдений имело место поражение одного яичника. Это замечание очень важно, так как является одним из основных морфологических признаков полинеоплазии. Во всех наблюдениях глубина инвазии опухолью миометрия не превышала половины, отсутствовала лимфоваскулярная инвазия, а также наряду с аденокарциномой в яичниках обнаружены очаги аденомиоза, что опять-таки является относительным доводом в пользу первичной множественности процесса.
Вернемся к вопросу гетерогенности практически всех злокачественных опухолей яичников, которую мы наблюдаем у большинства наших больных. В настоящее время уже не подвергается сомнению факт динамического изменения опухолевой ткани в процессе ее развития. В литературе неоднократно описаны наблюдения, показывающие сочетание и переход высокодифференцированных эндометриоидных опухолей в низкодифференцированные. Популяции опухолевых клеток обладают генетической, эпигенетической и фенотипической гетерогенностью, качественные и количественные параметры которой могут изменяться в течение неопластического процесса, обеспечивая тем самым агрессивное поведение как первичной опухоли, так и ее метастазов [13—15]. Гетерогенность в своих проявлениях многогранна, является самой сутью развития опухоли — механизм, который обеспечивает возможность прогрессирования опухоли, несмотря на антагонизм и агрессию микроокружения. Поэтому особенности первичной опухоли и ее метастазов могут существенно различаться, и не только на уровне морфлогии.
И это представляется вполне логичным. Микроокружение опухоли (локальный иммунитет, гормональный статус, кинины и т. д.), играющее значительную роль в развитии новообразования, может существенно отличаться в матке и яичниках, что накладывает отпечаток на генетические, эпигенетические и фенотипические характеристики опухоли.
Заключение
Несмотря на отсутствие четкой корреляции между генетическими и морфологическими особенностями исследованных нами опухолей яичников и эндометрия, первичная множественность опухолей вызывает сомнения, правда, если исключить парадокс вторичной мюллеровой системы, о котором говорилось выше. Поэтому, несмотря на существенную разницу в молекулярно-генетических параметрах, с нашей точки зрения, наиболее вероятным первоисточником эндометриодного рака яичников может служить именно опухолевая патология эндометрия.
И в заключение хочется задать сакраментальный вопрос: может ли возникнуть эндометриоидный рак яичников в отсутствие матки (эндометрия)?
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Сведения об авторах
Жорданиа К.И. — ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, г. Москва
Логинов В.И. — ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии», г. Москва
Чемерис Г.Ю. — ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, г. Москва
Читайте также: